1. 臨床表現(xiàn)

動物感染后連續(xù)觀察14天，正常對照組無動物發(fā)病或死亡。病毒感染組動物陸續(xù)表現(xiàn)出四肢癱瘓、自主運(yùn)動受限等狂犬病典型癥狀，最終發(fā)病死亡，見圖1。感染后第9天死亡2只，第10天死亡4只，第11天死亡4只。

圖1 DENV感染小鼠體重變化情況及臨床表現(xiàn)

2. 病理變化

取感染動物安樂解剖，取腦組織進(jìn)行HE染色，結(jié)果發(fā)現(xiàn)腦干血管周圍炎細(xì)胞袖套狀浸潤，神經(jīng)細(xì)胞變性壞死，出現(xiàn)嗜神經(jīng)細(xì)胞現(xiàn)象，見圖2。進(jìn)一步放大發(fā)現(xiàn)，在海馬回神經(jīng)細(xì)胞發(fā)現(xiàn)病毒包涵體，部分神經(jīng)細(xì)胞核消失，發(fā)生空泡病變，見圖3。使用曼氏染色和熒光染色，在動物腦組織發(fā)現(xiàn)明顯的狂犬病毒包涵體，見圖4。

圖2感染動物腦組織病理照片（100x）

圖3感染動物腦組織病理照片（200x）

圖4. 感染動物腦組織病理照片（400x）

圖5.感染動物腦干組織特染照片（400x）

1. 小鼠感染：三嗅乙醇0.6ml麻醉動物，從小鼠眼窩后緣眼角的斜上方進(jìn)針，減少對小鼠的損傷；進(jìn)針深度為3mm，使用塑料管控制進(jìn)針深度，保持結(jié)果均一性；緩慢推入病毒液40LD50/30μL，避免小鼠顱內(nèi)高壓；拔針時(shí)輔助按壓手法，減少漏液。

2. 臨床癥狀觀察：病毒感染后，每天觀察2次，上午、下午各1次。病毒感染時(shí)，密切觀察約2小時(shí)，注意給藥后30分鐘內(nèi)的反應(yīng)。詳細(xì)記錄動物出異常情況、動物死亡的時(shí)間等。并對整體觀察情況進(jìn)行詳細(xì)記錄。

3. 組織病理學(xué)觀察：取感染小鼠腦組織，甲醛固定，常規(guī)石蠟包埋切片，HE染色，光鏡下觀察腦組織病理組織學(xué)變化，神經(jīng)細(xì)胞胞質(zhì)出現(xiàn)內(nèi)基體，特殊染色和熒光染色陽性即可判定狂犬病病毒感染陽性。

一、 狂犬病概述

狂犬病是由狂犬病毒（Rabiesvirus, RV）引起的一種人畜共患的急性傳染病，又稱恐水病（hydrophobia）、瘋狗病等。狂犬病毒主要在動物間傳播，該病毒主要是通過動物咬人時(shí)唾液中的狂犬病病毒侵入人體而受到感染，其潛伏期一般為2-8周。病毒侵犯腦脊髓，主要癥狀為嗜睡、焦慮或煩燥不安，咬傷部位疼痛或感覺異常，怕風(fēng)、怕水，喝水或聽到水聲就引起咽喉肌肉痙攣，吞咽困難，痛苦萬狀，隨后發(fā)生癱瘓、昏迷，最后死亡。狂犬病一旦發(fā)病，其進(jìn)展速度很快，多數(shù)在3-5天，很少有超過10天的；由于狂犬病是致命性疾病，至今沒有特效治療方法，如不及時(shí)處理，一般會在50~60天內(nèi)發(fā)病，死亡率為100%。

二、狂犬病動物模型簡介

系統(tǒng)研究狂犬病的關(guān)鍵環(huán)節(jié)是動物試驗(yàn)，由于狂犬病毒的易感動物多，幾乎所有的溫血?jiǎng)游锒伎筛腥究袢。钥梢赃x擇不同種類的動物進(jìn)行模型研究。但不同動物的發(fā)病機(jī)制不同，這可能是由于不同狂犬病毒株的致病性不同，以及感染的模式、宿主的免疫狀態(tài)、狂犬病毒不同的敏感性等。在國內(nèi)外的研究中，科研人員建立和使用最多的動物模型為小鼠模型、犬模型、猴模型和蝙蝠模型等。每種動物模型都有其優(yōu)缺點(diǎn)和使用范圍，應(yīng)該依據(jù)研究目的進(jìn)行選擇。蝙蝠是歐洲和美洲狂犬病毒的重要儲存宿主之一，北美、拉丁美洲和歐洲對蝙蝠狂犬病研究較多，國內(nèi)未見使用蝙蝠模型的報(bào)道。